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        細胞實驗技術

      2. 我猜你不知道,細胞轉染率低是因為這個

        細胞轉染是細胞生物學和分子生物學的一種常用的技術手段,也是論文發表的必備實驗之一。而轉染效率低下卻是實驗狗們經常遇到的問題,尤其是原代細胞轉染,更是因為難度大,號稱誰碰誰死。細胞轉染實驗方法和實驗步驟,中洪菌在上期實驗專欄中已經詳細介紹了,(實驗專欄丨千萬別"作死",細胞轉染可以這樣做←......

        2018-04-17
      3. 細胞凍存、復蘇及細胞計數存活測試

        細胞凍存方法一般來說,細胞進行轉移,最佳的策略是進行低溫保存(-70℃~-196℃),而細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均已停止,即代謝處于完全停止狀態,故而可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程,在此溫度范圍內,冰晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。經過......

        2018-03-12
      4. 實用哺乳動物細胞培養手冊(上)

        細胞培養基本概念細胞培養實驗細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。細胞培養目的與用途1、科學研究:藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開發(1)新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、......

        2018-02-28
      5. 關于細胞凍存及細胞復蘇

        冷凍保存方法按照冷凍保護液在凍結后是否形成冰晶來劃分,凍存方法可分為非玻璃化和玻璃化凍存兩種。非玻璃化凍存是利用各種溫級的冰箱分階段降溫至-700C~-800C,然后直接投入液氮進行保存;或者是利用電子計算機程控降溫儀以及利用液氮的氣、液,按一定的降溫速率從室溫降至-1000C以下,再直接投入液氮......

        2017-12-06
      6. 流式細胞術在環境檢測中的應用

        隨著流式細胞術的發展,流式細胞儀越來越多的使用在環境相關的研究及檢測中。相對于傳統的平板法與顯微計數法,流式細胞術具有快速、靈敏、精確并能進行多參數分析的特點,且在后期使用成本上具有一定的優勢。自1993年流式細胞儀首次運用于活性污泥中微生物群落結構分析以來,該技術逐漸成為空氣、土......

        2017-12-02
      7. 細胞活力檢測

        在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力.細胞活力檢測意義編輯由組織中分離細胞檢查活力以了解分離過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查細胞活力,了解凍存和復蘇的效果。......

        2017-11-30
      8. 3D細胞培養

        傳統細胞培養技術在模擬細胞體內生存環境方面做得還不夠。3D細胞培養技術的發明就是為了在細胞培養過程中,為細胞提供一個更加接近體內生存條件的微環境......

        2017-10-28
      9. Transwell侵襲實驗總結之操作步驟

        一、將小室放入培養板中在上室加入300μl預溫的無血清培養基,室溫下靜置15-30min,使基質膠再水化。再吸去剩余培養液。二、制備細胞懸液①制備細胞懸液前可先讓細胞撤血清饑餓12-24h,進一步去除血清的影響。但這一步并不是必須的。②消化細胞,終止消化后離心棄去培養液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的無血清培......

        2017-10-26
      10. MTT檢測細胞活性的操作方法

        一、MTT是什么MTT是一種粉末狀化學試劑,全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,漢語化學名為3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍。是一種黃顏色的染料。二、MTT法用來做什么簡單地說:是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT主要有兩個用途1.藥物......

        2017-10-24
      11. 細胞瞬時轉染

        原理:通過脂質體介導轉染法及電穿孔等基因轉染技術,將靶基因導入細胞,一般在轉染后48小時左右,靶基因即可在細胞內表達。根據不同的實驗目的,48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。應用:觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)。一般流程:1)細胞接種:轉染......

        2017-10-19
      12. 細胞分離技術

        1.從原代組織中分離細胞將組織塊分離(散)成細胞懸液的方法有多種,最常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法。從原代組織中獲得單細胞懸液的一般方法是酶解聚。細胞暴露在酶中的時間要盡可能的短,以保持最大的活性。下列步驟可以解聚整個組織,獲得較高產量的有活性細胞。(1)胰......

        2017-10-18
      13. 軟瓊脂克隆形成實驗

        一、原理細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數,但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞??寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同,細胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養細胞克隆形成率弱,傳代細......

        2017-09-29
      14. 細胞劃痕實驗

        細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。材料:6孔板、marker筆、直尺、20微升槍頭(滅菌)、無血清培養基、PBS準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比......

        2017-09-28
      15. 人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養

        實驗材料新生兒臍帶試劑、試劑盒:PBS、膠原酶、M199培養基、胰酶、EDTA、DMEM培養基儀器、耗材:針頭、手術鉗、離心管、低溫離心機、彎管、明膠、恒溫培養箱、顯微鏡實驗步驟1.將15-20cm長的新生兒臍帶放入無菌的PBS溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存24小時,室溫下不超過6小時,否則廢棄)2.用一個鈍頭的......

        2017-09-26
      16. 腫瘤細胞體外傳代培養及保種

        實驗材料腫瘤細胞試劑、試劑盒:液氮、EDTA、保種液儀器、耗材:恒溫水浴鍋、低溫離心機、方瓶、CO2培養箱、-70度冰箱、彎管、顯微鏡、離心管、濾膜實驗步驟一、細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴,快速溶化,用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液,于1500轉/分,離心3分鐘。棄上清......

        2017-09-19
      17. 人臍動脈平滑肌細胞培養實驗

        人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒:膠原......

        2017-09-16
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